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为啥要学习使用液相色谱柱？

色谱柱的使用和***：液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路，建立液相色谱柱日常维护与***规程，保证能正常使用。

液相色谱柱的适用范围：

本规程适用液相色谱柱的维护与***。

责任人：

液相色谱柱使用者。

液相色谱仪在生物制药中的应用

液相色谱仪是近几十年发展起来的一种、快速的分离分析技术，是现代分离检测的重要工具。液相色谱仪是以经典液相色谱仪为基础，引入气相色谱仪的理论和实验方法，将流动相改为高压输送，采用固定相和在线检测等手段，发展而成的分离分析技术，具有高压、高速、、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点，成为生物制药领域发展快、应用的现代分析技术之一。

液相色谱柱分类

①根据对被检测样品的响应范围可以被分为：

通用型检测器：对绝大多数检测无知均有响应，如：TCD、PI。

选择型检测器：对某一类物质有响应，对其他物质的无响应或很小，如：FPD。

②根据检测器的检测方式不同可以分为：

浓度型检测器：测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，即检测器的响应值和组分的浓度成正比，如TCD、PID。

质量型检测器：测量载气中某组分单位时间内进入检测器的含量变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的质量成正比，如FID、FPD。

液相色谱柱外界因素影响

色谱是一种分离分析手段，分离是，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。

柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。即使好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。