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液相色谱法概述

液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

液相色谱法自20世纪60年代问世以来，由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器，实现了对样品的高速、和高灵敏度的分离测定。液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验，并引入微处理机技术，极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的液相色谱仪，其自动化程度很高，既能控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等)，又能对获得的色谱图进行收缩、放大、叠加，以及对保留数据和峰高、峰面积进行处理等，为色谱分析工作者提供了、功能齐全的分析工具。

液相色谱法可以不做标准曲线吗？

首先要明确做标准曲线的目的，一般是为了含量测定作为标准品来用。液相色谱的浓度和峰面积成正比，样品的含量未知，浓度也就未知，峰面积可读。那么这时需要一个已知含量和已知峰面积的对照品。这个时候做不做标准曲线要看试验方法，有的方法是外标法，也就是和你样品浓度一样的对照品，平行配制两个，进样分析。有的方法是内标法，就需要样品中添加内标物。还有的面积化，那就什么对照都不要进了。方法要看你的质量标准，上面应该有计算方法，上面写的是什么，就按照什么来做。不是非标准曲线不可的。