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发布时间:2022-05-12 06:04:53
连续色谱层析技术
尽管传统色谱分离技术被广为采用,但其仍存在一系列问题亟待解决:
? 溶剂消耗量大,综合生产成本居高不下;
? 填料使用量大,单位填料产出少,工业化生产成本进一步提高;
? 某些低分离度品种分离受限,无法工业化;
? 对于某些特殊样品(如手性药i物),没有太好的解决办法等等。
然而连续色谱分离技术能够实现物料连续使用,应用同等规模的填料和溶剂却可大幅度提高样品处理量,对于某些化学结构相类似的成分,仍然能够获得较理想的分离度和样品回收率。该技术主要能够很好地解决大、小分子原i料药、功能糖等的连续化分离问题,在降低缓冲液用量的同时,提高填料利用率,降低生产成本,目前已经广泛应用于石油化工、食品工程和生***工等领域,如:
ü 糖醇类分离:果葡糖浆、菊粉、低聚果糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖醇、核糖等;
ü 手性药i物和天然产物分离:紫杉醇、鱼i油、芍药苷、大豆卵磷脂、氟i西汀、酮洛i芬等;
ü 精细化工:香精香料、色素、不饱和脂肪酸等;
ü 石化:PX及其类似物、碳五碳六中正异构烷烃等;
ü 生物大分子:蛋白多肽(亲和层析)、核酸等。
特别适合生产应用,特点包括
·高重复性:适用于任何规模的工艺放大
·高物理、化学稳定性:易于清洗、消毒及再生、介质寿命特长
高动力载量、流速快:缩短生产周期和次数,节省凝胶用量(尤其XL介质,载量可比普通介质高达10倍)
使用调节器( flow adaptor )- 保护柱床的同时更可提高分辨率,节省凝胶
柱子物料须生物兼容,并有尤良的化学抗性
加上装柱器( packing reservoir ),可一步把凝胶装满柱子,大大提高柱效,尤其是凝胶过滤柱
柱子的过滤网孔径应该是凝胶颗粒的1/3,一般10um孔径就够用,如用SOURCE15介质装HR柱和XK柱,须换上5um的网
XK柱完全配合AKTA及各种自装的凝胶,是佳的选择
选择层析方法
用分离范围宽广的凝胶过滤介质如Superose, Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份
用含专一配体或的亲和层析介质结合目标蛋白,一步即可得到高纯度样品;亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质
体积大的样品,往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化;高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化
疏水层析用高盐吸附,低盐洗脱的原理,洗脱的样品又可直接上离子交换介质;两种方法常被交替使用
离子交换层析介质 离子交换层析介质
离子交换(IEC)是依据生物分子表面正电荷(类型、数量和遍布)差别完成对不一样生物分子的分开的方式 。纳微给予的根据单分散化均一粒度高聚物脂质体的离子交换层析介质,历经亲水性表面改性材料后再引线键合离子交换官能团,依据使用要求的不一样提 供四个系列产品的商品,达到、轻中度纯化、细致纯化、剖析纯化各阶段的运用,具备的生物活性分子结构相溶性和柱床可靠性, 为顾客给予微生物试品从试验室纯化到工业生产的总体解决方法。
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