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液相色谱法概述

HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的，其以液体作为流动相，并采用颗粒极细的固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同，但填料更加精细，需高压泵推动，柱效高，分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程，其组成、比例和pH值可灵活调节，分离模式多样。在实际操作中主要通过改变流动相的组成来调节样品在色谱柱的保留值和选择性，从而使不同样品得到分离。

正确的液相色谱仪使用方法

随着实验方法的大量开发和成熟，目前液相色谱在包括食品、***、化工、生命、环境等领域内大量使用，其作为一种通用分析检测设备在高校、科研院所、***、监管机构、工厂企业中广泛配置。为了提高液相色谱仪的工作效率，延长液相色谱仪使用寿命，应该如何正确的使用液相色谱仪！

1．检查溶剂托盘托盘上的溶剂是否足量，以溶剂液面超过过输液管过滤头5厘米以上为宜。

2．检查输液管内部有否气泡，若有，应及时通过排液阀排出。

3．对溶剂（针对项看是否需要补充溶剂）和样品进行处理，过滤，脱气。

4．打开主机电源，依次打开检测器，泵A，泵B，柱箱的电源

5．打开电脑，开启色谱工作站

6．先在工作站中开启活塞泵，以所需的流动相平衡系统（约需30min）

7．打开灯，等待系统基线走稳

8．开始进样检测

液相色谱仪常见故障解决方案

如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障？

流动相内产生都无法清除不断产生的气泡，主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5%溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被***，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀，纯冲洗半小时即可。