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抗l体的层析分离步骤基本

都可以采用标准化的三步曲：步用Protein A介质进行抗l体捕获和浓缩；第二步用离子交换进行中间纯化以去除多聚体，宿主蛋白等杂质；第三步是精纯去除剩余DNA，Endotoxin,Protein A 等微量杂质。在这三步抗l体的分离纯化过程中，步的Protein A亲和捕获占据分离纯化成本80%以上，也是下游分离纯化的瓶颈所在。亲和层析之所以成本高的主要原因：首先是Protein A 价格昂贵，其价格是普通层析介质十几倍；第二，Protein A使用寿命短，一般离子交换填料使用寿命多达1000次，而亲和填料寿命通常在100-200次；第三，Protein A 用于抗l体的捕获和浓缩，需要处理大体积的发酵液，而亲和步骤载量往往又低于阴阳离子交换层析，使得亲和层析介质使用量比中间纯化或精纯的要多得多。因此，要降低抗l体的生产成本，解决抗l体的生产瓶颈关键在于改进步Protein A 亲和捕获。

如何选择固相萃取柱？

选择固相萃取柱的关键除了要求的规格之外，决定分离性能的是它的填料。在选择萃取柱时，必须根据待检测样品的种类及其***性质选择合适的填料。固相萃取填料通常是色谱吸附剂，大致可以分为三大类，分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。但SOURCE 产品的粒径只有30微米，不能满足Protein A 介质对粒径一般要大于40微米的要求。纳微经过多年的努力开发出世l界领l先的微球制备技术，突破大单分散大粒径多孔微球的制备难题，成为家生产单分散Protein A 亲和层析介质的公司。

层析填料装置

锥形封头一种负压层析装置，它包括：柱体上端设有快开式紧锁锁紧的上锥形封头和上锥形卡套相互卡接，上锥形封头上部设有负压接口经负压阀、汽液分离器与负压泵相连，柱体下端设有快开式紧锁锁紧的下锥形封头和下锥形卡套相互卡接，下锥形封头下部设有进液接口经进液管道与三通阀体上部的出液接口相连，三通阀体下部分别设有两个与进液管道相连的进液接口。

层析填料寿命衰减的影响因素

每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理，及装填柱床时的压缩柱床，然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压，压缩柱床也要对填料施压，反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。

柱床被严重污染或者进气泡时，拆装清洗比CIP效果更好，更有利于填料寿命衰减的降低。